تأثیرکارایی، قابلیت، محرمانه بودن، پاسخگویی، غرامت و تماس بر وفاداری مشتریان

منبع: (پژوهشگاه علوم و فناوری اطلاعات ایران، ۱۳۹۲)
۲-۱۲٫ جمع بندی
بدلیل اهمیت و تأثیرگذاری فوق العاده خدمات الکترونیک و نفوذ لاینفک آن در سیستم بانکداری و تجارت، سعی گردید به جنبه ها و مفاهیم موضوع در حد اختصار و لزوم پرداخته شود. در مدل مفهومی طرح ریزی شده تحقیق نیز سعی شده است بیشترین تعداد مؤلفه ها، معرفی و تبیین گردند. با مروری بر تحقیقات انجام گرفته در گذشته مشاهده می شود تعدد، تنوع و به روز بودن آنها تأکید بیشتری بر مبتلا به بودن و علاقمندی روزافزون جوامع به این شاخه از علوم دارد. همچنین مقایسه مؤلفه های مدل مفهومی این تحقیق با مؤلفه های تحقیقات مشابه، از فراگیر بودن و جامعیت نسبی آن حکایت دارند. از طرفی بیانگر این نکته نیز می باشد که دستیابی به نتایج تحقیق مستلزم دقت نظر در جمع آوری داده ها و تجزیه و تحلیل دقیق آنهاست.
فصل سوم:روش تحقیق
۳-۱٫مقدمه
هدف تمام علوم، شناخت و درک دنیای پیرامون ماست. به منظور آگاهی از مشکلات دنیای اجتماعی، روش های علمی، تغییرات قابل ملاحظه ای پیدا کرده اند. این حرکتها سبب شده که برای بررسی رشته های مختلف انسانی، از روش های علمی استفاده شود. از جمله ویژگیهای مطالعه علمی که هدفش حقیقت یابی است، استفاده ا ز یک روش تحقیق مناسب می باشد و انتخاب روش تحقیق مناسب به هدفها، ماهیت و موضوع مورد تحقیق و امکانات اجرائی بستگی دارد و هدف از تحقیق دسترسی دقیق و آسان به پاسخ پرسشهای تحقیق است(ایران نژاد پاریزی، ۱۳۷۸،ص.۹).

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

مراحل عمده روش علمی یا روش تحقیق به شرح ذیل است:
۱-پی بردن به مساله
۲-جستجوی پیشرفته
۳-تدوین فرضیه
۴-مشاهده و آزمون فرضیه
۵-پذیرش، رد یا تعدیل کردن فرضیه (سرمد و همکاران،۱۳۸۳)
در این پژوهش نیز از این فرایند تبعیت شده است و بنابراین در این فصل به منظور تشریح علمی این روش، جامعه آماری و علل انتخاب آن، نمونه آماری و نحوه انتخاب آن، روش گردآوری اطلاعات از نمونه ها، روش و نوع وسیله جمع آوری اطلاعات، روش های آماری مورد استفاده برای تجزیه و تحلیل نتایج اطلاعات به طور مفصل ذکر شده است.
۳-۲٫روش تحقیق
روش تحقیق مجموعه ای از قواعد، ابزار و راه های معتبر(قابل اطمینان) و نظام یافته برای بررسی واقعیتها، کشف مجهولات و دستیابی به راه حل مشکلات است(خاکی،۱۳۷۸،ص.۲۰۱).
این تحقیق پیمایشی از نوع مقطعی می باشد. روش مقطعی به منظور گردآوری داده ها درباره یک یا چند موضوع در یک مقطع از زمان (یک روز، یک هفته، یکماه، یکسال) از طریق نمونه گیری از جامعه انجام می شود. همچنین از آنجایی که این تحقیق درباره یک موضوع واقعی، عینی، زنده و پویا صورت گرفته است و از نتایج آن می توان بطور علمی استفاده کرد، یک تحقیق کاربردی نیز می باشد. هدف تحقیقات کاربردی، توسعه دانش کاربردی در یک زمینه خاص است.
۳-۳٫متغیرهای تحقیق
در انجام پژوهش برای پاسخ به سؤالات یا آزمودن فرضیه ها، لازم است که متغیرها شناسائی شوند. در این پژوهش از ۳ نوع متغیر استفاده شده است:
الف)متغیرمستقل(اصلی): متغیر مستقل ویژگی و خصوصیتی است که بعد از انتخاب توسط محقق در آن دخالت یا دستکاری می شود و مقادیری را می پذیرد تا تأثیر آن بر روی متغیر وابسته مشاهده شود(خاکی،۱۳۷۹،ص.۱۶۷). متغیرهای مستقل در این تحقیق کیفیت خدمات الکترونیک و اثربخشی تبلیغات دهان به دهان می باشند.
ب)متغیر وابسته(خروجی): یک متغیر اصلی است که در قالب یک مسئله برای تحقیق مورد بررسی قرار می گیرد. یعنی متغیرهای وابسته، شرایط یا خصایصی هستند که با وارد کردن، از میان برداشتن یا تغییر متغیرهای مستقل ظاهر می شوند، از بین می روند و یا تغییر می کنند(خاکی،۱۳۷۹،ص.۱۶۶). متغیر وابسته در این تحقیق نیات رفتاری مشتریان می باشد.
ج) متغیر واسطه، میانجی(مداخله گر): این متغیرشدت یا جهت ارتباط بین دو متغیر مستقل و وابسته را تغییر می دهد. به عبارتی مکانیسم ارتباط دو یا چند متغیر را برقرار می نماید. متغیر واسطه ای یا مداخله گر در این تحقیق عبارتست از: تجربه
۳-۴٫روش گردآوری داده ها
در این پژوهش از دو روش کتابخانه ای و میدانی جهت گردآوری اطلاعات استفاده شده است.
۳-۴-۱٫روش کتابخانه ای
هر محققی قبل از شروع پژوهش و هنگامی که به موضوعی ویژه پرداخت، ناگزیر از مراجعه به کتابخانه خواهد بود. با مطالعه کتابها، مقاله ها و تحقیقات دیگران که در حوزه موضوع اوست، موضوع پژوهش خود را خالص تر و رساتر سازد. برای پیشینه و ادبیات پژوهش این تحقیق از کتابخانه و مراجعه به اینترنت استفاده شده است.
۳- ۴-۲٫روش میدانی
دراین تحقیق ابزار گردآوری داده های اولیه از طریق پرسشنامه بوده است. پرسشنامه اولیه تهیه گردید که پس از اظهار نظرهای اصلاحی استادان محترم راهنما و مشاور در نهایت به پرسشنامه مقدماتی تبدیل گردید. پرسشنامه مذکور در بین چند تن از صاحبنظران توزیع شد تا با این وسیله اشکالات اجتماعی و سؤالات ناقص شناسایی و مرتفع شود. سپس تعدادی از پیشنهادهای اصلاحی این عزیزان با نظر استاد راهنما لحاظ گردید. در پایان با اصلاحات پرسشنامه مقدماتی، پرسشنامه نهایی تحقیق طراحی شده و در بین جامعه آماری تحقیق توزیع گردید. پرسشنامه این تحقیق از نوع محقق ساخته می باشد. اعتبار و روایی آن نیز با تکنیکهای آماری مناسب مورد ارزیابی قرار گرفته است.
پرسشنامه شامل ۲ قسمت عمده است:
الف)اطلاعات عمومی پاسخگو: در این بخش از سؤالات سعی شده تا اطلاعات کلی و جمعیت شناختی مربوط به پاسخ دهندگان جمع آوری شود که شامل ۵ سؤال است.
ب)اطلاعات اختصاصی: این بخش شامل سؤالات تخصصی است که در طراحی آنها سعی شده تا حد ممکن قابل فهم و ساده باشند. سؤالات مربوط به فرضیات تحقیق که تعداد آنها ۳۶ سؤال است، برای تعیین، توضیح و سپس آزمون فرضیات تحقیق است. برای طراحی این بخش از طیف ۵ بخشی لیکرت مطابق جدول ۳-۱ استفاده گردیده است، که از رایج ترین مقیاسهای اندازه گیری به شمار می رود.
جدول ۳-۱)مقیاس ۵ گزینه ای لیکرت

خیلی مخالفم

مخالفم

نظری ندارم

موافقم

خیلی موافقم

۱

۲

۳

لیسانس

۱۳۴

۳۵%

۴

فوق لیسانس و بالاتر

۸۸

۲۳%

جمع کل

۳۸۴

۱۰۰%

با توجه به جدول و نمودار ۴-۴- مدرک تحصیلی ۱۸ درصد افراد پاسخگو، دیپلم بوده، ۲۴ درصد آنها دارای مدرک فوق دیپلم، ۳۵ درصد دارای مدرک لیسانس و ۲۳ درصد نیز دارای مردک فوق لیسانس و بالاتر بوده اند.
نمودار ۴- ۴- توزیع فراوانی پاسخگویان بر اساس سابقه خدمت
۴-۳- یافته‌های استنباطی
در این قسمت با اسفاده از تکنیک معادلات ساختاریافته و از روش لیزرل به تجزیه و تحلیل داده‌ها پرداخته می‌شود. روش لیزرل شامل دو مرحله می‌باشد که در مرحله اول با بهره گرفتن از تحلیل عاملی تأییدی به دنبال تأیید متغیرهای مدل هستیم که متغیر‌های تحقیق طی تحلیل عاملی تأیید یا رد می‌شوند و در مرحله دوم با بهره گرفتن از مدل ساختاری به دنبال اثبات فرضیات تحقیق هستیم. در این پژوهش برای آزمودن فرضیه­ اصلی یک مدل و برای فرضیه ­های فرعی از ۲ مدل متفاوت استفاده شده است.

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

۴-۳-۱- تحلیل عاملی تأییدی متغیرهای مدل
ابتدا تحلیل عاملی تأییدی متغیر مستقل که در این تحقیق مدیریت ارتباط با مشتری می‌باشد را انجام می‌دهیم سپس تحلیل عاملی تأییدی متغیرهای وابسته که در این تحقیق متغیرکیفیت رابطه و ارزش چرخه عمر مشتری می‌باشند انجام می‌گیرد.
۴-۳-۲- تحلیل عاملی تأییدی متغیر مستقل (مدیریت ارتباط با مشتری)
چون در این تحقیق متغیرمدیریت ارتباط با مشتری دارای بعد نمی‌باشد و مستقیماً با پرسش سنجیده شده است پس جزء متغیرهای یک مرحله ای هستند و یک تحلیل عاملی دارد. تحلیل عاملی مرتبه اول که رابطه بین متغیرهای مشاهده شده (پرسش‌ها) وخود متغیر اصلی را بررسی می‌کند.
۴-۳-۳- نتیجه تحلیل عاملی تأییدی متغیر مدیریت ارتباط با مشتری
مدل در حالت تخمین استاندارد
نمودار ۴-۵- تحلیل عاملی تأییدی متغیرمستقل در حالت تخمین استاندارد
در تحلیل عاملی مرتبه اول رابطه بین متغیر و پرسش‌ها را بار عاملی می‌گویند. باید همه بارهای عاملی هر متغیر همگی بزرگتر از ۰٫ ۵ باشند تا پذیرفته شوند. در شکل بالا همه بارهای عاملی بزرگتر از ۰٫ ۵ هستند پس می‌توان گفت که این متغیر به خوبی توسط پرسش‌هایش سنجیده شده است. همان طور که در شکل ۴-۵ نیز مشخص است تمام عامل‌ها دارای بارارهای عاملی معنادار و نسبتا بالایی هستند. نتایج به دست آمده از شکل فوق نشانگر تأیید تحلیل عاملی تأییدی و مدل مفهومی تحقیق می باشند. در شکل ۴-۵ مستطیل‌ها نقش متغیر مشاهده گر و بیضی‌ها نقش متغیر مکنون را دارند.
مدل در حالت ضرایب معناداری
نمودار ۴-۶- تحلیل عاملی تأییدی متغر مستقل در حالت ضرایب معناداری
منظور از معنادار بودن یک ضریب، این است که عدد معنادار بودن آن باید بزرگتر از ۹۶/۱ یا کوچکتر از ۹۶/۱- باشد. در شکل شماره ۴-۶ تمام ضرایب معناداری بزرگتر از ۱٫ ۹۶ می باشند که نشانگر تأیید تحلیل عاملی تأییدی در این مرحله می‌باشد.
۴-۳-۴- تحلیل عاملی تأییدی متغیرهای مستقل
در این تحقیق متغیرکیفیت رابطه نقش متغیر وابسته میانجی را دارد و متغیر ارزش چرخه عمر مشتری نیز نقش متغیر وابسته نهایی می‌باشد. چون متغیر کیفیت ارتباط مستقیم با پرسش سنجیده شده است جزء متغیر‌های یک مرحله ای است و تنها یک تحلیل عاملی دارد ولی متغیر ارزش چرخه عمر مشتری چون دارای بعد می‌باشد دو تحلیل عاملی دارد. تحلیل عاملی مرتبه اول که از پرسش‌ها به ابعاد می‌رسیم و تحلیل عاملی مرتبه دوم که از ابعاد به متغیر اصلی می‌رسیم.
۴-۳-۵- بررسی تحلیل عاملی تأییدی متغیر کیفیت رابطه
مدل در حالت تخمین استاندارد
شکل ۴-۷- تحلیل عاملی تأییدی متغیر کیفیت رابطه در حالت تخمین استاندارد
مدل در حالت ضرایب معناداری
شکل ۴-۸- تحلیل عاملی تأییدی متغیر کیفیت رابطه در حالت ضرایب معناداری
نتایج تحلیل عاملی تأییدی متغیر کیفیت ارتباط نشان می دهد که کلیه بارهای عاملی بزرگتر از ۰٫ ۵ هستند و همه اعداد معناداری نیز بزرگتر از ۱٫ ۹۶ می باشند که نشان دهنده تأیید پرسش‌های متغیر کیفیت ارتباط است.
۴-۳-۶- بررسی تحلیل عاملی تأییدی مرتبه اول متغیر ارزش چرخه عمر مشتری
مدل در حالت تخمین استاندارد
شکل ۴-۹- تحلیل عاملی تأییدی مرتبه اول متغیر ارزش چرخه عمر مشتری در حالت تخمین استاندارد

کار گروهی ، دوستانه و صمیمی ؛
تعارض و ابهام ؛
ذهن حرفه ای و سازمانی ؛
چالش های شغلی ، اهمیت و گوناگونی؛
اعتماد متقابل ( والانس و هانت^[۱۵۳] ، ۱۹۹۹، ۵۵۲).
۲-۲-۷-۶-مطالعات سوسمان ودیپ^[۱۵۴]
سوسمان و دیپ(۱۹۴۴) مولفه های هدف ، نقش ، ﭘاداش ، رویه ها و ارتباطات را به عنوان ابعاد جو سازمانی معرفی می کنند. اگر چه اندیشمندان در رابطه با تعریف جو سازمانی اتفاق نظر ندارند ، ولی اکثر آنان در خصوص ویژگی های آن دیدگاه های یکسانی ابراز داشته اند (سوسمان ودیپ ، ۱۹۴۴).
۲-۲-۷-۷-مطالعه های رنسیس لیکرت^[۱۵۵]
رنسیس لیکرت به منظور بررسی جو سازمانی، نمودار ویژگی های سازمانی به نام سیمای ویژگی های سازمانی^[۱۵۶] را ارائه کرده است که دارای هشت بُعد از خصوصیت های بنیادی سازمان می باشد. مدل سیمای ویژگی های سازمانی روش مناسبی برای جمع آوری ادراکاتی که در سازمان وجود دارد می باشد. این موضوع اهمیت بالایی در سازمان برخوردار می باشد چرا که از طریق آن می توان نگاه سازمان را به افراد آن و چگونگی اعتقادات افراد را به آن را به نمایش می گذارد.( براون^[۱۵۷] ، ۲۰۰۴، ۱۹) . لیکرت بر این باور است که هر چه جو سازمانی انسان دوستانه تر باشد هم درجه بالایی از کارکرد پدید می آورد و هم رضایت شغلی بیشتری فراهم می سازد.

گیبسون و همکاران^[۱۵۸](۱۹۷۳) این بُعدها با توجه به نظریه نظام های مدیریتی چهارگانه وی در شکل ذیل مورد مقایسه و تطبیق قرار داده اند.
جدول شماره (۲-۴) : سیمای ویژگی های سازمانی

نظام یک نظام دو نظام سه نظام چهارم
(خودکامه) (محتاطانه) (مشورتی) (مشارکتی)

۱ ـ فراگرد رهبری خودکامگی مشارکتی
(غیرپشتیبانی کننده) (پشتیبانی کننده)

۲ ـ نیروهای انگیزشی کم زیاد

۳ ـ فراگرد ارتباط ضعیف قوی
(تحریف شده) (صحیح)

۴ ـ فراگرد تعامل ـ نفوذ سرد گرم
(بافاصله) (نزدیک)

۵ ـ فراگرد تصمیم گیری یک طرفه مشترک

۶ ـ ترتیب هدف ها یک طرفه مشترک

۷ ـ فراگرد نظارت سلسله مراتبی تخصصی

۸ ـ هدف گذاری متوسط خیلی بالا

منبع : (ناظم، ۱۳۸۷، ۱۸)
۲-۲-۷-۸-مطالعات جو سازمانی بر اساس مدل مک کلند^[۱۵۹]
عناصری از قبیل ساختار سازمانی ، ساختار اجتماعی ، رهبری ، مدیریت، فرایندهای تصمیم گیری و نیازهای اعضای سازمان ، فاکتورهای محیطی مهمی برای سازمان و ادراک افراد به منظور درک آنان از جو سازمانی در محیط کاری به شمار می آیند. طبق نظر استرینگر (۲۰۰۲) این عناصر موجود در مدل جو سازمانی با مدل نیازهای مک کلند ارتباط پیدا می نماید. این مدل شامل ۳ دسته نیاز می باشد که شامل نیاز به موفقیت^[۱۶۰]، نیاز به وابستگی^[۱۶۱] و نیاز به قدرت^[۱۶۲] است. مدل به وجود آمده شامل سه دسته جو می باشد که شامل جو موفقیت محور ، جو قدرت محور و جو وابستگی محور می باشد ( هنوجک^[۱۶۳] ،۲۰۰۵، ۶۷).

۲-۶-۵-الکترود­های پلیمری: شرط اصلی برای استفاده از آشکارساز­های الکتروشیمیایی در روش­های تجزیه­ای، قابلیت اکسایش یا کاهش گونه مورد نظر در پتانسیل نسبتاً پایین می­باشد. اکثر واکنش­ها از اضافه ولتاژ بالایی برخوردار می­باشند. این مساًله منجر به کاهش حساسیت و گزینش­پذیری روش­های الکتروشیمیایی می­گردد. یک روش معقول برای کاهش حساسیت و گزینش­پذیری روش­های الکتروشیمیایی، استفاده از گونه اصلاح­گر^[۶۲] در سطح الکترود است. گونه­ های اصلاح­گر یا واسطه اکسایش یا کاهش ترکیبات فعال الکتروشیمیایی هستند که انتقال الکترون بین گونه مورد اندازه ­گیری و الکترود را تسریع می­نمایند. حضور گونه اصلاح­گر در سطح الکترود، باعث بهبود قابل توجه حساسیت و گزینش­پذیری و نیز کاهش حد تشخیص روش­های الکتروشیمیایی می­گردد. روش­های مختلفی برای تهیه الکترود­های اصلاح شده شیمیایی به کار گرفته می­ شود. یکی از این روش­ها تشکیل لایه نازک پلیمر مزدوج در سطح الکترود است[۳و۱۱و۱۲و۲۳]

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

۲-۶-۶-انواع مواد هوشمند: مواد هوشمند اصطلاحاًً به موادی گفته می شود که می­توانند با درک محیط و شرایط اطراف خود نسبت به آن واکنش مناسب نشان دهند. در مواد هوشمند، هم­زمان با تاثیر محرک بیرونی شاهد پاسخ­دهی به آن هستیم. در اکثر موارد این مواد از توانایی پاسخ به بیش از یک شرایط محیطی برخوردار هستند و پاسخ آنها قابل پیش بینی است. مکانیزم هوشمندی در این مواد، عکس­العمل در برابر تحریکات خارجی است. این عکس­العمل تغییر در ابعاد و هندسه ماده را شامل می­ شود. از جمله این مواد می­توان به پنجره­های هوشمند ساخته شده از پلیمر­های مزدوج اشاره کرد، که در برابر تابش خورشید تاریکی تدریجی به وجود می­آورند[۳و۱۱و۲۰]
وسایل تبادل یون، کاتالیز کردن، ابرخازن^[۶۳]­ها، ترانزیستور­های اثر میدان^[۶۴]، دیود­ها^[۶۵] و کاربرد به عنوان محافظ خوردگی و … از دیگر کاربرد­های پرشمار این مواد است[۳-۵ و ۹و۱۱-۱۴].
۲-۷- مزایا و معایب
ویژگی­های پلیمر­های رسانا با فلزات قابل مقایسه است. رسانایی پلیمر­های رسانا به رسانایی فلزاتی مثل مس و آهن نمی­رسد این مسلماً مزیتی برای فلزات نسبت به پلیمر­های رسانا­ست. از دیگر ویژگی­های فلزات که پلیمر­های رسانا فاقد آن هستند. استحکام، قابلیت ذوب شدن و انحلال است. پس با این وجود چرا از پلیمر­های رسانا استفاده می­ شود؟
رسانایی فلزات ثابت است، اما رسانایی پلیمر­های رسانا متغیر و قابل کنترل است. این رسانایی با توجه به شرایط سنتز و تقویت متغیر است. بنابراین می­توان رسانایی را با توجه به استفاده و کاربرد پلیمر تنظیم کرد. اما این تنها حسن این مواد نیست؛ چگالی کم، شفافیت، قابلیت فرایند شدن و ارزان بودن و خواص نوری برجسته از دیگر ویژگی­های ممتاز پلیمر­های مزدوج است[۲]. اما پلیمر­های رسانا معایب و محدودیت­هایی نیز دارند. محدودیت ذوب شدن، استحکام پایین، تجزیه با آب و هوا و نامحلول بودن در حلال­های معمولی از نقایص مهم این مواد هستند. امروزه تحقیقات پژوهشگران در جهت رفع این کاستی­ها و بهینه کردن خواص وکاربرد­های پلیمر_­های رسانا است. استفاده از پلیمر­های آروماتیک یا پلی­هتروسیکل­ها یکی از این راهکار­ها ست که پایداری پلیمر­های رسانا را در برابر عوامل محیطی افزایش می­دهد و همچنین به دلیل رزونانسی که هترو­اتم در سیستم مزدوج ایجاد می­ کند، جا­به­جایی الکترون و رسانایی را افزایش می دهد. با افزودن استخلاف­های مناسب به هتروسیکل­ها می­توان خواص جدیدی به پلیمر­ها اضافه کرد. به عنوان مثال استخلاف گروه ­های آلکیل به هتروسیکل­هایی مثل پیرول و تیوفن حلالیت آن­ها را افزایش می­دهد. اتصال استخلاف به حلقه می ­تواند وضعیت مولکول را از نظر قطبش­پذیری، بار الکتریکی، انرژی پایداری و … تغییر دهد و حتی بسته به الکترون دهنده و الکترون کشنده بودن و قوت و ضعف این خاصیت در استخلاف بر رسانایی نیز موثر است. از این نظر این پایان نامه به بررسی تاثیر استخلاف آلکیل بر خواص پلی­تیوفن می ­پردازد و از آن­جایی که این بررسی­ها نیاز به شناخت دقیق تیوفن، آلکیل­تیوفن، پلی­تیوفن و شرایط تهیه این پلیمر دارد، فصل آینده نگاهی به این مونومر و پلیمر آن، استخلاف آلکیل به تیوفن و مکانیزم، پیکربندی و شرایط سنتز پلی(آلکیل­تیوفن) به عنوان مقدمه­ای برای ورود به بحث اصلی خواهد داشت.
فصل سوم
پلی(آلکیل­تیوفن)
۳-۱-تیوفن
تیوفن یا تیوفوران یا تیاسیکلوپنتادی­ان با فرمول C₄H₄S یک مایع بی­رنگ یا زرد بسیار کم­رنگ با بویی شبیه بوی کهنگی، کپک­زدگی و پوسیدگی است. نقطه ذوب آن C ˚۳۸- و نقطه جوش آن C˚۸۴ است. چگالی آن g/ml 05/1 است[۲۴]. تیوفن دارای ویسکوزیته­ی ۸۷۱۲/۰ سانتی پواز در دمای C˚ ۲/۰ و ویسکوزیته­ی ۶۴۳۲/۰ سانتی پواز در دمای C˚ ۴/۲۲ است. تیوفن یک ترکیب حلقوی آروماتیک با یک حلقه پنج ضلعی مسطح است که زاویه پیوند در CSC برابر˚۹۳ و در CCS برابر ˚۱۰۹ و در CCC برابر ˚۱۱۴ است.طول پیوند Å C-S‎۷/۱ و طول پیوند CC متصل به گوگرد Å ۳۴/۱ و طول پیوند CC دیگر Å ۴۱/۱ است.
تیوفن در شرایط عادی پایدار است و در آب نامحلول و در بسیاری از حلال­های آلی قابل حل است. تیوفن اشتعال پذیر، تا حدی سمی و محرک پوست و چشم است. اولین بار ویکتور میر^[۶۶] در سال ۱۸۸۲ وجود آن را به صورت ناخالصی در بنزن حاصل از قطران زغال سنگ کشف کرد و نام تیوفن را برای نشان دادن تشابه ظاهری آن به بنزن به آن داد[۲۵]. تیوفن به صورت طبیعی در بعضی فراورده­های گیاهی، تخم مرغ و مخمر وجود دارد؛ اما به عنوان جزیی از فراورده­های دارویی، مصنوعی و مواد رنگی اهمیت بیشتری دارد. هم اکنون روش­های صنعتی و تجاری مناسبی برای تولید تیوفن­ها از مواد اولیه آلیفاتیک وجود دارد. یک روش مهم شامل ترکیب یک ماده آلیفاتیک دارای یک واحد خطی چهار کربنی با یک منبع گوگرد عنصری مثل گوکرد یا دی­سولفیدکربن در سطح یک کاتالیزور در دمای C˚ ۷۰۰-۲۰۰ است. روش دیگر ساخت تیوفن با بهره گرفتن از استیلن و وینیل­کلراید و هیدروژن­سولفید است[۲۶]. سالانه دو ملیون کیلوگرم تیوفن در سراسر جهان تولید می­ شود. تیوفن یک ترکیب غنی از الکترون است و تمایل زیادی برای واکنش با الکترون دوست­ها دارد. هالوژن­ها (X) به سرعت با تیوفن ترکیب می­شوند و C₄X₄S را می دهند[۲۷].
۳-۲- پلی­تیوفن
از پلیمریزاسیون تیوفن، پلی­تیوفن به دست می ­آید. مطالعه این پلیمر مزدوج از چند دهه قبل آغاز شده است. رونکالی^[۶۷] در سال ۱۹۹۲ تحقیقاتی روی سنتز الکتروشیمیایی پلی­تیوفن انجام داد[۲۸]. رونکالی مطالعاتی هم روی ویژگی­های الکترونیکی این پلیمر انجام داد[۲۹].مک­کالو^[۶۸] در سال ۱۹۹۸ بر سنتز شیمیایی پلی­تیوفن تمرکز کرد. تحقیقاتی که در سال­های اخیر صورت گرفته است نشان داده است که سیستم­های الیگوتیوفن که دو انتهای زنجیر با گونه­ های متفاوت مولکولی مثل فلورن، اتر­های تاجی و . . . بسته شده است، فلوئورسانس و جذب بالایی نشان می­ دهند.
چنان­که پیش از این بیان شد، پلی­تیوفن­ها نسبت به پلیمر­های رسانایی مثل پلی­استیلن پایداری محیطی بالاتری نشان می­ دهند اما از نظر حلالیت تاکنون حلالیت آن­ها در حلال­های آلی و مخلوط­هایی مثل آرسنیک­تری­فلوراید و آرسنیک­پنتا­فلوراید گزارش شده است[۱۱]. استخلاف آلکیل­ها به پلی­تیوفن این پلیمر را از نظر حلالیت ارتقا می­دهد. پلیمرشدن تیوفن از موقعیت α و ׳α (کربن­های مجاور به گوگرد) صورت می­گیرد و در نتیجه استخلاف در موقعیت β و ׳β (کربن­های دورتر از گوگرد) قرار می­گیرد.
۳-۳- پیکربندی پلی(آلکیل­تیوفن­ها)
نحوه قرار گرفتن مونومر­های آلکیل­تیوفن در کنار یکدیگر در زنجیر الیگومری یا پلیمری از مباحث جالب در این حوزه است. در ابتدا دو مونومر ۳- آلکیل­تیوفن با یکدیگر پیوند برقرار می­ کنند. این دو مونومر به سه شکل متفاوت می­توانند به یکدیگر متصل شوند.

(الف) (ب ) (ج)
شکل۳-۱ الف: جفت شدن دم­به­دم (TT^[69]) ب: جفت شدن سر­به­دم (^[۷۰]HT) ج: جفت شدن سر­به­سر (HH^[71])
در مرحله بعدی مونومر سوم به دیمر متصل می­ شود که۴ شکل متفاوت تری­مر به وجود می ­آید:

الف:HH-TH ب: HH-TT

ج :HT-HT د: TT-HT
شکل۳-۲- انواع آرایش تری­مر­ها در تشکیل تری­آلکیل تیوفن.
روشن است که این پیکربندی­ها از نظر خواص متفاوت هستند (و در خصوص آن بررسی­های متعددی انجام شده است که در جای خود در فصل­های آتی ارائه خواهد شد.)
مونومر­های آلکیل تیوفن در یک زنجیر می­توانند به طور منظم کنار یکدیگر قرار گیرند و الیگومر­هایی با آرایش متفاوت نظیر شکل ۳-۲ را تشکیل دهند. اما ممکن است این زنجیر­ها به شکل نامنظم هم تشکیل شود. مطالعات نشان داده است که وقتی مونومر­ها به صورت منظم تشکیل زنجیر پلیمری می­ دهند خواص بسیار بهتری دارند. به عنوان مثال تحقیقات السنبامر^[۷۲] و همکارانش روی پلی(­آلکیل­تیوفن­ها) نشان داده است که رسانایی یک زنجیر نامنظم S/cm50 است در حالی که رسانایی زنجیر­های منظم به S/cm 140 هم می رسد[۳۰]. همچنین پیکربندی منظم پایداری محیطی بالاتر و خواص مکانیکی و فرایندپذیری بهتری را نشان می­دهد[۳۱]. این­که تشکیل پلی­(آلکیل­تیوفن) با یک پیکربندی منظم یا نامنظم صورت می­گیرد به عواملی مثل روش تهیه، اثر حلال و . . . وابسته است[۳۲].
۳-۴- مکانیزم پلیمر شدن
چنان­که قبلاً بیان شد می­توان پلیمر­های رسانای الکتریکی را به هر یک از روش­های پلیمر شدن تهیه کرد و سپس عمل تقویت را روی آن­ها انجام داد. همان طورکه می­دانیم روش الکتروشیمیایی بر سایر روش­ها برتری دارد. یکی از دلایل آن­ عمل هم­زمان سنتز و تقویت است. با این وجود چنان که بیان شد روش شیمیایی هم مزایای مخصوص به خود را دارد. در این­جا با توجه به این که هر دو روش در تهیه پلی­تیوفن و مشتقات آلکیلی آن مورد مطالعه و علاقه پژوهشگران بوده اند به روش­ها و مکانیزم­ های مربوط به هر دو روش پرداخته خواهد شد.
۳- ۴- ۱- روش شیمیایی
در مورد سنتز شیمیایی پلی(­آلکیل­تیوفن) گفته می­ شود که مزیت استفاده از این روش این است که می­توان پلی(­آلکیل­تیوفن­های) استخلاف شده با پیکربندی کاملاً منظم تولید کرد. از حدود سی سال پیش دانشمندان متعددی روی تولید پلی­تیوفن در حلال تتراهیدروفوران و با بهره گرفتن از کاتالیزور­های استیل استونات مثل Pd(acac)₄ و Ni(acac)₄ کار کرده اند. اما سنتز پلی­(آلکیل­تیوفن) با بهره گرفتن از چند روش مشهور صورت می­گیردکه در ذیل به چند نمونه معروف به طور اختصار اشاره می­ شود:
۳- ۴- ۱- ۱- روش مک­کالو
به طور خلاصه در این روش ابتدا برومواسیون آلکیل­تیوفن اتفاق می­افتد. سپس ترانس متالاسیون صورت می­گیرد و بعد جفت شدن عرضی در حضور کاتالیزور نیکل، پلی­(آلکیل­تیوفن) را ایجاد می­ کند. پلی(­آلکیل­تیوفن) تولید شده از این روش HT – HT کامل است. مراحل این روش به صورت مبسوط در مراجع [۳۳ و ۳۴] آورده شده است که مکانیزم آن در شکل ۳- ۳ نمایش داده شده است[۳۳ و ۳۴].

شکل ۳- ۳- مکانیزم روش مک­کالو در تولید پلی­آلکیل­تیوفن [۳۳].
۳- ۴- ۱- ۲- روش ریک^[۷۳]
این روش مشابه مک­کالو است و تفاوت چندانی با روش قبلی ندارد . در این روش از ZnCl₂ به جای MgBr₂ در روش قبلی استفاده شده است و مکانیزم همان مکانیزم قبلی است. این مکانیزم در شکل ۳- ۴ نمایش داده شده است[۳۳و ۳۵و۳۶ ]

شکل ۳- ۴- مکانیزم روش ریک در تولید پلی(آلکیل­تیوفن)[۳۳].
۳- ۴- ۱- ۳- روش پلیمر شدن اکسایشی
مزیت این روش به دو روش قبلی این است که در دمای اتاق انجام می­ شود و در نتیجه فرایند ساده­تری دارد. این مکانیزم با بهره گرفتن از تری­کلرید­آهن انجام می­ شود که می­توان بعضی گونه­ های اکسنده­ی دیگر را جایگزین آن کرد. این روش نیز بهره بالای HT-HT دارد[۳۷]. مکانیزم این روش در شکل۳- ۵ نشان داده شده است.

شکل ۳- ۵ مکانیزم روش پلیمر شدن اکسایشی در تولید پلی(آلکیل­تیوفن)[۳۳].
۳- ۴- ۲ روش الکتروشیمیایی
الکتروپلیمر شدن تیوفن، پلی­تیوفن­هایی با رسانایی بالا و پایداری مناسب در برابر هوا تولید می­ کند. در فرایند پلیمر شدن به صورت الکتروشیمیایی یا الکتروپلیمر شدن، پتانسیل اعمالی از محلولی شامل یک الکترولیت و تیوفن عبور داده می­ شود. علی­رغم مزایای این روش ، مشکل اصلی این است که ساختار­هایی با درجات متفاوتی از پیکربندی نامنظم تولید می­ شود.
در این روش آغازگر­های پلیمرشدن (آنیون، کاتیون، رادیکال) توسط اکسایش یا کاهش روی سطح الکترود به وجود می­آیند و از آن پس مراحل رشد پلیمر می ­تواند در محلول یا سطح الکترود ادامه یابد. پلی­تیوفن به روش الکتروشیمیایی در سال ۱۹۸۲ توسط تورلون^[۷۴] و گارنیه^[۷۵] تهیه شد[۴۰] و پس از آن بررسی­های مختلف در مورد شرایط الکتروپلیمر شدن و همچنین خواص پلیمر حاصل و بررسی اثر عوامل مختلف بر الکتروپلیمر شدن توسط بسیاری از دانشمندان انجام گرفت.
۳-۴- ۲- ۱- مکانیزم الکتروپلیمر شدن
مکانیزم پذیرفته شده برای الکتروپلیمرشدن به صورت زیر است:
در اثر اکسایش، مونومر یک الکترون ازدست می­دهد و یک رادیکال کاتیون به وجود می ­آید. این رادیکال کاتیون به سه شکل رزونانسی وجود دارد. محاسبات انجام شده روی این شکل­ها نشان داده است که چگالی الکترون جفت نشده در موقعیت α نسبت به اتم گوگرد بیشتر از سایر موقعیت­ها­ست [ ۴۱ و۶۸]. بنابراین رادیکال کاتیون شماره۳ اهمیت بیشتری دارد.

در مرحله بعد دیمر شدن اتفاق می­افتد. دو رادیکال کاتیون (۳) از موقعیت α پیوند می­یابند و پس از حذف دو پروتون دیمر خنثی به وجود می ­آید.

مورفین
پتیدین
جنتامایسین
ست جراحی
PBS
فرمالین ۱۰%
اتانول ۷۰%
لایزینگ بافر
سلول‌های فیبروبلاست
FBS
تریپسین
محیط کشت DMEM
XTT
PMS
پنیسیلین استرپتومایسین
رنگ تریپان بلو
لام نئوبار
بیوپسی پانچر
هود لامینار
انکوباتور CO₂
میکروسکوپ اینورت
پیپت پاستور ۱۰ ml
فلاسک کشت ۲۵, ۷۵ cm²
فالکن ۱۵, ۵۰ ml
تیوب‌های استریل ۲ ml
پلیت ۹۶ خانه
الایزا ریدر
پیپتور
ورتکس
سمپلر و سر سمپلر
۳-۲٫ طرز تهیه‌ی محلول‌ها و معرف‌های بکار رفته
۳-۲-۱٫ محیط کشت DMEM
محیط کشت DMEM با گلوکز بالا و غنی شده با L-glutamate به صورت آماده از شرکت آریوژن خریداری می‌گردید. بسته‌های خریداری شده به حجم ۵۰۰ ml بود و به منظور جلوگیری از آلودگی، در فالکون‌های ۵۰ ml تقسیم شده و در یخچال نگهداری شدند.
FBS
در این پژوهش از سرم جنین گاو استفاده شد. نقش سرم در محیط کشت تأمین فاکتور‌های رشد هورمون‌ها و برخی اسید آمینه‌ها و پیش‌ساز‌های اسید نوکلئیک و اسید چرب می‌باشد. به منظور غیر فعال کردن کمپلمان موجود در آن، در بن ماری در دمای ۵۶ درجه سانتی‌گراد به مدت ۳۰ دقیقه حرارت داده شد. پس از غیر فعال کردن کمپلمان‌ها، FBS در لوله‌های فالکون استریل تقسیم و در فریزر ۲۰- درجه نگهداری شد. میزان مصرف آن در محیط کشت DMEM 10% می‌باشد.
۳-۲-۲٫ بافر PBS
یک عدد قرص PBS در ۲۰۰ ml آب مقطر دو بار تقطیر حل شد. سپس با بهره گرفتن از فیلتر استریل شده و در لوله‌های فالکون ۵۰ ml استریل، الیکوت و در ۲۰- نگهداری شد.
۳-۳٫ کشت سلول‌های فیبروبلاست
سلول‌های فیبروبلاست از بانک سلولی آزمایشگاه کشت سلولی دانشگاه تربیت مدرس تهیه شده و در شرایطی استریل به آزمایشگاه مربوطه منتقل شدند. به منظور آماده‌سازی محیط کشت فیبروبلاست، به محیط کشت DMEM (Dulbecco’s modified Eagle’s medium, Gibco) FBS و پنسیلین- استرپتومایسین در شرایط کاملاً استریل مخلوط و در یخچال نگهداری شد. هر بار پیش از مصرف، دمای آن به کمک حمام آب گرم به ۳۷ درجه سانتی‌گراد رسانیده می‌شد. محیط کشت DMEM مشتق از MEM می‌باشد که حاوی حداقل مواد لازم برای رشد سلول (اسیدهای آمینه، ویتامین‌ها و نمک‌ها) می‌باشد. بافر PBS به صورت استریل و از اختلاط KCl،KH₂PO₂ ، NaCl، Na₂HPO₄ تهیه و به عنوان محلول شستشو قبل از جداسازی سلول‌ها و همچنین به عنوان رقیق کننده تریپسین مورد استفاده قرار گرفت. این بافر هم در یخچال نگهداری و قبل از مصرف به دمای ۳۷ درجه سانتی‌گراد رسانیده شد.

( اینجا فقط تکه ای از متن پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

سلول‌های فیبروبلاست تحت شرایط استریل در فلاسک T-75 و در انکوباتور با دمای ۳۷ درجه و %۵ CO₂و رطوبت ۹۵% کشت داده شدند. سلول‌ها هر روز برای بررسی میزان رشد و تکثیر و همچنین آلودگی احتمالی یا تخریب سلولی زیر میکروسکوپ معکوس مورد مشاهده قرار گرفتند و محیط کشت آنها به هنگام لزوم (مثلاً کاهش pH محیط و تغییر رنگ آن از قرمز به زرد) تعویض گردید. هنگامی‌که سلول‌ها تقریباً ۹۰% سطح فلاسک را می‌پوشاندند، پاساژ سلولی انجام می‌گرفت و پس از پاساژ دهم، از سلول‌ها برای انجام مطالعات سیتوتوکسیسیتی استفاده شد. برای پاساژ، مایع رویی فلاسک دور ریخته شد و برای اینکه محیط کشت به طور کامل خارج شود محلول استریل PBS اضافه گردیده و تخلیه شد. در این مرحله به فلاسک عاری از محیط کشت، تریپسین آماده اضافه شد و فلاسک به مدت یک دقیقه در انکوباتور نگهداری شد تا سلول‌های چسبیده به کف جدا شده و به صورت معلق درآیند. سپس محتویات فلاسک به لوله‌های فالکن استریل منتقل شدند تا با دور RPM 1500‌ به مدت ۵ دقیقه سانتریفیوژ شوند. پس از اتمام سانتریفیوژ، مایع رویی فالکن‌ها در زیر هود تخلیه شده و مجدداً محیط کشت اضافه شد و با عمل پیپتاژ کلمپ‌های سلولی از هم باز شدند. در این مرحله سلول‌های موجود در سوسپانسیون بدست آمده با بهره گرفتن از رنگ‌آمیزی تریپان بلو و لام نئوبار با کمک میکروسکوپ معکوس، شمارش شدند.
۳-۴٫ آماده‌سازی غلظت‌های مختلف لیپو پلی ساکارید
در این تحقیق از LPS سالمونلا انتریکا که از شرکت سیگما خریداری شده بود برای تیمار فیبروبلاست‌ها استفاده شد. به منظور جلوگیری از آلودگی، محلول استوک LPS به میزان ۲/۰ میلی‌گرم بر میلی‌لیتر در آب دو بار تقطیر استریل تهیه شده و در میکروتیوب‌های استریل در یخچال نگهداری شدند. جهت رقیق‌سازی LPS و بدست آوردن غلظت‌های مختلف از محیط کشت فیبروبلاست به عنوان رقیق کننده استفاده گردید. غلظت‌ها به صورت نیم لگاریتمی‌ و در محدوده‌ی ۱۰۰، ۶/۳۱، ۱۰، ۱۶/۳، ۱ میکرو گرم تا ۳۱۶، ۱۰۰، ۶/۳۱، ۱۰، ۱۶/۳ نانوگرم تهیه شدند. با توجه به اینکه LPS تمایل زیادی به چسبیدن به دیواره‌ی ظرف دارد قبل از هر بار استفاده عمل ورتکس انجام می‌گردید.
۳-۵٫ تیمار لیپو پلی ساکاریدی فیبروبلاست‌ها
پس از تهیه‌ی غلظت‌های مختلف LPS، محتویات هر میکروتیوب به ردیف‌های traff 12 خانه منتقل شدند. برای تیمار، سلول‌ها به دو گروه تقسیم‌بندی شدند. گروه اول گروهی بود که تیمار آنها بدون انکوباسیون ۲۴ ساعته بود یعنی دقیقاً همان روزی که سلول‌ها در پلیت کشت داده شدند بدون هیچ وقفه‌ای تیمار هم برای آنها انجام گرفت. گروه دوم گروهی بود که سلول‌هایی که از ۲۴ ساعت قبل در پلیت‌های ۹۶ خانه در انکوباتور کشت داده شده بودند توسط LPS تیمار گردیدند. به ازای هر ۵۰ ماکرولیتر سلول، ۵۰ ماکرو لیتر هم از غلظت‌های مختلف LPSدر هر ردیف اثر داده شد. سپس پلیت‌های تیمار داده شده به مدت ۲۴، ۴۸ و ۷۲ ساعت در انکوباتور نگهداری شدند تا برای رنگ‌آمیزی XTT آماده شوند.
۳-۶٫ رنگ‌آمیزی XTT
۲۴ ساعت قبل از انجام این رنگ‌آمیزی، سلول‌ها در پلیت ۹۶ خانه کشت داده شدند. بطوری که به هر چاهک ۱۰۰ ماکرولیتر از محیط کشت اضافه گردید. هر تست یک بلانک داشت که فقط حاوی محیط کشت بود. برای شروع کار، معرف XTT و معرف فعال کننده PMS سریعاً قبل از آغاز آزمایش به دمای ۳۷ درجه رسانیده شد. برای آماده‌سازی محلول واکنشگر کافی برای یک پلیت ۹۶ خانه ۱۲۰ ماکرولیتر PMS و ۶ میلی‌لیتر XTT نیاز بود. بعد از اضافه کردن محلول واکنشگر به هر چاهک، پلیت مربوطه به مدت ۲ و ۴ ساعت در انکوباتور نگهداری شد. سپس میزان جذب نوری نمونه‌ها توسط الایزا ریدر (ELISA-reader) با طول موج ۴۵۰-۵۰۰ نانومتر سنجیده شد.
حساسیت روش XTT به دلیل حضور یک عامل فعال کننده به نام PMS (N- متیل دی بنزوپیرازین متیل سولفات) که نوعی حامل الکترون واسطه است تقویت می‌شود. ترکیب PMS به احیای XTT و تشکیل مشتقات فورمازان کمک می‌کند. روش XTT به دلیل عدم استفاده از ایزوتوپ‌های رادیواکتیو ایمن‌تر از MTT می‌باشد. با توجه به اینکه جذب رنگ در این روش متناسب با تعداد سلول‌ها در هر چاهک است دقیق‌تر از MTT می‌باشد. این روش طی یک مرحله در دو ساعت جواب می‌دهد. در این روش به غیر از دو معرف XTT و PMS هیچ معرف اضافی دیگر و شستشوی سلولی مورد نیاز نیست.
شکل ۳-۱٫ احیای کلرومتریک XTT با آنزیم‌های سلولی
۳-۷٫ رنگ‌آمیزی تریپان بلو
این آزمایش برآوردی تقریبی از viability سلول‌ها بود که بر اساس عدم جذب رنگ تریپان بلو توسط سلول‌های زنده استوار می‌باشد. در حالی که سلول‌های مرده نسبت به این رنگ نفوذپذیر بودند. این رنگ تمایل زیادی به پروتئین‌های موجود در سرم دارد به همین دلیل قبل از رنگ‌آمیزی سلول‌ها به خوبی با PBS شسته داده شدند تا پروتئین‌های باقی مانده سرم کاملاً از محیط خارج شوند.